一种构建基因组文库的改进方法

• 作者: 张娟 徐松 马立新
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因文库 水稻基因组 方法学
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 717-720
• 页数: 4页
• 分类号: Q3
• 字数: 3851字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-9772.2006.06.015

摘要

构建基因组文库是一项非常基础和重要的工作.但利用传统方法构建基因组文库存在操作步骤繁琐、背景高等问题.为了解决这些问题,对传统构建文库的方法进行了改进.由于EarⅠ位点经酶切后突出3个可变碱基,经过设计可使酶切后的两个粘端无法匹配,从而防止载体环化,所以用两个EarⅠ位点作为克隆位点.基因片段是通过用Sau3AⅠ部分酶切基因组总DNA,并在部分酶切片段的3′凹端补一个碱基G获得,因此片段无法串连或环化.实验构建了基于上述改进的ARS探针载体pHBM803/Trp,并分别用改进方法和传统方法构建水稻基因组文库进行比较.实验结果表明,经过上述两点改进可使文库质量大大提高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马立新	湖北大学生命科学学院分子微生物学与基因工程研究室	77	616	14.0	21.0
2	张娟	湖北大学生命科学学院分子微生物学与基因工程研究室	7	74	4.0	7.0
3	徐松	湖北大学生命科学学院分子微生物学与基因工程研究室	1	6	1.0	1.0