巢式聚合酶链反应-序列特异引物法用于单卵裂球HLA-A位点分型研究

• 作者: 叶碧绿 周颖 徐力辛 徐炳森 杨焕明 林金菊 胡咏武 许康朴 黄学锋
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单卵裂球 种植前胚胎 人类白细胞抗原分型
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 156-160
• 页数: 5页
• 分类号: R394|R71
• 字数: 3698字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1003-9406.2006.02.008

摘要

目的评价巢式聚合酶链反应-序列特异引物法(polymerase chain reaction-sequence specific primer, PCR-SSP)用于人类种植前胚胎的单个卵裂球HLA-A位点分型的准确性和可靠性.方法通过扩增HLA-A第2外显子评价单卵裂球巢式第1轮扩增的成功率,用巢式PCR-SSP法进行单卵裂球HLA-A分型.结果从10个家系的体外受精剩余胚胎中获得120个卵裂球,巢式第1轮扩增平均成功率为86.7%,其中前期家系F1～F5为78.2%,后期家系F6-F10为93.8%;对80个卵裂球进一步做SSP分型,其中11个卵裂球HLA-A第2外显子扩增失败,无分型结果,而69个卵裂球HLA-A第2外显子扩增成功,都获得分型结果.除6个卵裂球因亲本纯合无法判断是否发生缺失外,剩下63个卵裂球中,基因型与根据亲本预测的结果相符的有59个,占93.6%;显示缺少部分亲本等位基因的有3个,占4.8%;显示部分亲本等位基因重复的1个,占1.6%.结论在第1轮扩增成功的基础上,巢式PCR-SSP法用于单卵裂球HLA-A分型准确可靠,可用于临床上筛选与需要造血干细胞移植的患儿HLA型等同的胚胎.