反复-70℃冻融对人眼脉络膜黑色素瘤OCM-1细胞中肿瘤干细胞的杀伤作用

• 作者: 刘斌 张文忻 彭展 李永平
• 来源期刊: 国际眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脉络膜黑瘤 肿瘤干细胞 反复冻融(6):1278-1282
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1278-1282
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4445字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5123.2006.06.013

摘要

目的:研究反复-70℃冻融对人眼脉络膜黑色素瘤OCM-1细胞中肿瘤干细胞的杀伤作用.方法:复苏OCM-1细胞,使用标准DMEM/F12培养基培养后,改用无血清化学限定培养基(serum-free medium,SFM)培养,并分离纯化肿瘤干细胞(choroidal melanoma stem cells,CMSCs).分别对OCM-1和纯化的CMSCs反复-70℃冻融后,MTT比较杀伤比率的差异.光镜及共聚焦显微镜观察细胞形态学改变.结果:在标准DMEM/F12培养基中贴壁生长的OCM-1细胞,使用SFM培养基培养后,贴壁细胞明显减少,第6代的CMSCs细胞,均为悬浮团状集落生长,呈现典型的干细胞生长方式,CD133阳性比率达到79.8%,Musashi-1强阳性表达.MTT比色法显示,反复-70℃冻融对OCM-1和CMSCs的杀伤比率存在显著差异.光镜及共聚焦显微镜观察发现,冻融后OCM-1细胞出现大量的凋亡细胞,而CMSCs则以坏死为主,凋亡细胞少见.结论:反复-70℃冻融对分化良好的OCM-1细胞主要是诱导其凋亡.而OCM-1中存在的肿瘤干细胞CMSCs对冷冻更加敏感,冻融后大量死亡,这是肿瘤在冷冻治疗后发生退变消失的根本原因.