反义RNA抑制synaptotagminⅡ在RBL-2H3的表达及对胞吐的作用

• 作者: 吕文利 吴健民 张继成 胡俊华
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 钙结合蛋白 肥大细胞 基因表达 溶酶体 胞吐
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 104-108
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4036字
• 语种: 中文

摘要

目的:研究SynaptotagminⅡ(简称Syt2)在RBL-2H3(简称RBL)中的表达及其在胞吐中的作用.方法:通过Western blot 检测Syt2在RBL中的表达情况.用高保真酶扩增Syt2,与pEGFP-N1构建全长反义基因表达载体,电穿孔转染RBL,G418筛选获得稳定转染细胞.通过钙离子载体和抗原刺激,应用Western blot 检测稳定转染细胞和对照细胞分泌的组织蛋白酶D,分析Syt2对胞吐的影响.结果:在RBL中检测到Syt2表达.构建了pEGFP-N1-Syt2-AS质粒,插入片段测序结果与GenBank登录号NM012665(rat Syt2)序列完全一致.经转染和G418筛选,获得了稳定转染细胞RBL-Syt2-AS,Western blot结果显示,两株RBL-Syt2-AS表达的Syt2均明显减少,分别只有对照的8%和10%.经刺激后,RBL-Syt2-AS分泌的组织蛋白酶D较对照明显增加.结论:Syt在RBL中表达,其对RBL溶酶体胞吐起负调控作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴健民	华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科	87	544	11.0	18.0
2	吕文利		20	24	3.0	4.0
3	胡俊华	华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科	5	26	4.0	5.0
4	张继成	华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科	6	5	1.0	2.0