重组增强型绿色荧火蛋白腺相关病素转染兔晶状体上皮细胞的研究

• 作者: 丁芝祥 刘丹 刘双珍 李忠庆 谭浅
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 腺相关病素 增强型绿色荧光蛋白 晶状体上皮细胞
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 889-892
• 页数: 4页
• 分类号: R776
• 字数: 3551字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-5141.2006.12.003

摘要

目的 研究2型重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus 2,Raav2)载体介导增强型绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP)对体外培养兔晶状体上皮细胞(N/N1003A)的转染和病毒载体对晶状体上皮细胞增生的影响,探讨Raav2作为后囊膜混浊基因治疗载体的可行性.方法　Raav2-EGFP按感染复数(multiplicity of infection,MOI)为104、105、2×105、106转染N/N1003A细胞,倒置荧光显微镜下观察晶状体上皮细胞中EGFP的表达,流式细胞仪检测Raav2-EGFP对N/N1003A细胞的转染效率,MTT比色法测定Raav2载体对N/N1003A增生的影响.结果 EGFP在细胞中的表达呈绿色,弥漫于整个胞浆.rAAV2-EGFP的转染效率随着MOI的增加和时间的延长而增加,MOI=106时,转染后第7 d达到71.12%.MTT法显示各转染组与未转染组A值无统计学差异.结论　重组腺相关病毒载体可以介导EGFP基因高效稳定转染晶状体上皮细胞,并且对细胞增生无抑制作用,腺相关病毒作为后囊膜混浊基因治疗载体是可行的.