PstS1-卡介苗重组疫苗的构建

• 作者: 吴雪琼 张灵霞 张翠英 朱琳 董恩军 陆阳
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: PstS1 重组卡介苗 结核分支杆菌
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 297-300
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3311字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2006.02.035

摘要

目的:构建结核分支杆菌分泌蛋白磷酸盐特异转运系统1(PstS1)的重组卡介苗.方法:以结核分支杆菌H37Rv基因组为模板,通过PCR扩增获得PstS1基因序列;将PstS1基因与大肠杆菌-卡介苗穿梭表达质粒PMD31重组,得到S-PMD31重组质粒,对S-PMD31重组质粒进行HindⅢ、BanH Ⅰ双酶切及测序鉴定,转化大肠杆菌,用IPTG对工程菌株进行诱导表达,并通过电穿孔技术将S-PMD31重组质粒导入卡介苗中构建重组卡介苗.结果:用引物P1、P2对结核分枝杆菌H37Rv基因组进行PCR扩增获得长为1 100 bp的PstS1基因序列,S-PMD31重组质粒的HindⅢ、BanHⅠ双酶切及测序鉴定证实:PstS1基因正确插入载体PMD31中,并能在大肠杆菌中诱导表达.通过质粒提取及PCR扩增表明重组质粒正确导入卡介苗中.结论:成功地构建了PstS1重组卡介苗,预期能提高卡介苗的免疫原性和保护力.