重构腺相关病毒转导PDX-1对C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用

• 作者: 严励 李莉 杨川 王川 程桦 陈黎红 黎峰
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: PDX-1 成肌细胞 胰岛素分泌细胞 腺相关病毒
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 486-490
• 页数: 5页
• 分类号: R587
• 字数: 3987字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2006.05.003

摘要

[目的]重构含有PDX-1的腺相关病毒载体,将PDX-1转导入C2C12细胞,观察胰岛素分泌量的改变.[方法]应用PCR方法将PDX-1从pZL1质粒中克隆出来,安装到Stratagene公司的腺相关病毒(AAV Helper-Free System)表达系统中,转染HEK293细胞,培养72 h,提取病毒悬液,转导PDX-1进入C2C12细胞中,检测细胞培养液中的胰岛素含量.[结果]①用X-gal染色系统检测,可见有蓝色的阳性细胞.②病毒的粗略的浓度经计算后大约为1012/mL,转导的病毒数约为1011.③PCR结果:用重构的腺相关病毒转导后C2C12有胰岛素及PDX-1的mRNA的表达.④用重构的腺相关病毒转导PDX-1进入C2C12后的培养液的胰岛素浓度为(5.5±1.1)μIU/mL,较其他方法也有较明显的增加(P＜0.05).[结论]通过应用含有PDX-1基因的重构腺相关病毒载体可以转导PDX-1在C2C12细胞中表达,且可以提高C2C12分化为胰岛素分泌细胞的分泌量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李莉	中山大学附属二医院内分泌科	50	174	7.0	10.0
2	陈黎红	中山大学附属二医院内分泌科	43	389	11.0	17.0
3	严励	中山大学附属二医院内分泌科	221	1598	19.0	30.0
4	程桦	中山大学附属二医院内分泌科	113	817	15.0	23.0
5	黎峰	中山大学附属二医院内分泌科	12	82	5.0	9.0
6	王川	中山大学附属二医院内分泌科	29	218	9.0	13.0
7	杨川	中山大学附属二医院内分泌科	76	431	11.0	19.0