绵羊IFN-γ基因的克隆与序列分析

• 作者: 夏伦斌 王新华 王运宏 荣光 薄新文 连宏军 郭燕 钟发刚 闫丽辉
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊 IFN-γ基因 克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 69-72
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|S858.26
• 字数: 2041字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2006.10.017

摘要

将无菌采集的绵羊(湖羊)脾脏淋巴细胞进行体外培养,利用刀豆蛋白(ConA)刺激24 h后提取总RNA,采用RT-PCR扩增绵羊IFN-γ基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,经PCR和双酶切鉴定后进行测序.测序结果表明,扩增的cDNA全长554 bp,包含501 bp开放阅读框,编码166个氨基酸,分子质量约为18.4 ku. 克隆的绵羊IFN-γ基因与GenBank上已公布的人、牛、山羊、马鹿、马、骆驼、猪、狗、猫和鸡的IFN-γ核苷酸序列进行比较,其同源性分别为75.2%,96.6%,99.0%,95.8%,83.0%,88.8%,86.6%,82.4%,53.9%和32.9%,与其他品种绵羊的核苷酸同源性为100%;氨基酸序列同源性分别为61.7%,94.6%,98.2%,92.2%,77.8%,86.8%,77.8%,76.0%,39.5%和6.7%,这为进一步研究绵羊IFN-γ基因的表达、生物学活性和应用奠定了一定基础.