摘要:
目的:采用尾静脉液压法注射SB转座元(sleeping beauty transposon)系统转人类白细胞介素10 (human interleukin-10,hIL-10)在大鼠肝组织中的表达.方法:采用Ringers溶液20 mL经尾静脉10-12 s内快速注射.实验分组:Ringets 20 mL对照组、DOTAP 100μg空白组、DOTAP 100 μg+pT-hIL-10 50μg转基因组、pT-hIL-10 50μg+pCMV-SB 5 μg共注射组(每组n=6).尾静脉注射后采血检测肝功能和转基因组血清中hIL-10的表达.RT-PCR法检测转基因组术后7,14 d肝组织中hIL-10 mRNA的表达.结果:尾静脉注射后1,4,7 d Ringers 20 mL组、DOTAP组、DOTAP+pT-hIL-10组、pT-hIL-10+pCMV-SB共注射组ALT水平分别为:4339±602,13 516±535,6576±347,445l±465;984±125,4087±600,2117±243,1158±130;592±85,2339±300,1384±165,40±663 nkat/L.DOTAP+pT-hIL-10组、pT-hIL-10+pCMV-SB共注射组术后1,4,7,14 d血清hIL-10浓度分别为:818.3±24.9,640.7±20.6,441.3±25.4,322.3±15.4和1008.3±65.8,820.8±20.9,675.8±31.6,438.2±26.0 μg/L,两组相比有显著差异(P<0.01).转座元转基因组2 wk后仍有hIL-10 mRNA表达,高于DOTAP转基因组.结论:尾静脉液压法注射转hIL-10可在大鼠肝组织中较长时间表达,联合SB转座元系统转hIL-10可提高转基因的效率.