hIL-10在大肠杆菌中的表达及其生物学活性鉴定

• 作者: 刘建宁 吴盛 孙自勇 智强 王旻东 陈俊勇
• 来源期刊: 南京师大学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 人白细胞介素-10(hIL-10) 克隆 表达 大肠杆菌 生物学活性 夹心ELISA
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 62-65
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2957字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-4616.2006.03.014

摘要

构建了含有人白细胞介素-hIL-10(Human Interleukin 10,hIL-10)基因的重组质粒,在大肠杆菌中的高效表达,并对其生物学活性进行了鉴定.用RT-PCR扩增hIL-10 cDNA,并插入原核表达载体PET-32b.将重组质粒转入BL21(DE3)感受态细胞,在37℃用IPTG诱导hIL-10表达.表达的重组蛋白经复性纯化后,用夹心ELISA法检测其对外周血单核细胞(PBMC)合成IFN-γ的抑制作用.重组质粒PET-32b/hIL-10的DNA序列分析显示,克隆的DNA序列和文献报道的hIL-10 cDNA序列一致.SDS-PAGE表明,重组蛋白相对分子质量为18 000.活性测定结果显示,重组蛋白能显著抑制PBMC合成IFN-γ.这表明构建的PET-32b/hIL-10可以在大肠杆菌中高效表达,经复性和纯化后,获得了具有高纯度和活性的hIL-10.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘建宁	南京大学分子医学研究所	31	169	7.0	12.0
2	孙自勇	南京大学分子医学研究所	17	93	6.0	9.0
3	王旻东		4	1	1.0	1.0
4	吴盛	南京大学分子医学研究所	5	58	3.0	5.0
5	陈俊勇	南京大学分子医学研究所	2	0	0.0	0.0
6	智强	南京大学分子医学研究所	1	0	0.0	0.0