原代培养大鼠肝窦内皮细胞凋亡的检测及意义

• 作者: 朱瑾 李晓武 熊燕 董家鸿 陈平
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肝窦内皮细胞 细胞培养 凋亡
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 515-517
• 页数: 3页
• 分类号: R322.47|R329.2|R329.28
• 字数: 2848字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.06.007

摘要

目的检测原代分离培养肝窦内皮细胞(sinusoidal endothelial cells,SECs)的凋亡状况.方法用胶原酶灌注结合Percoll密度梯度离心加选择性贴壁的方法分离SEC;用光镜形态学、Ⅷ因子和CD14免疫细胞化学染色及RECA-1单抗间接免疫荧光法及SEM鉴定SEC;采用TEM及AnnexinV联合PI双染的方法检测SEC的凋亡.结果分离培养的SEC得率为(2.06±0.35)×107/只大鼠,活力≥92%,纯度达90%;光镜下细胞形态典型,Ⅷ因子染色阴性而CD14染色阳性,RECA-1单抗间接免疫荧光染色阳性,SEM下可见SEC表面具有典型的窗孔结构;即使在培养基中加入ECGF,TEM下仍可观察到SEC出现凋亡的典型形态特征,且随培养时间延长,凋亡率明显升高,培养12 h的SEC凋亡率与新鲜分离的相比,差异已具有显著性(F=53.11,P＜0.05).结论体外培养的SEC存在明显的自发凋亡,且这种凋亡呈生长因子抵抗性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓武	第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所全军肝脏移植重点实验室	35	164	8.0	11.0
2	朱瑾	第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所全军肝脏移植重点实验室	26	88	6.0	8.0
3	董家鸿	第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所全军肝脏移植重点实验室	175	1283	18.0	25.0
4	陈平	第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所全军肝脏移植重点实验室	82	529	12.0	19.0
5	熊燕	第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所全军肝脏移植重点实验室	9	24	3.0	4.0