用原核增强子提高hTERT启动子介导的基因表达

• 作者: 周银 夏家辉 夏昆 李剑 李卓 梁德生 潘乾 王丽娜 胡友金 薛志刚 薛金锋
• 来源期刊: 中华肿瘤防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 端粒,末端转移酶/遗传学 启动区(遗传学) 增强子元件(遗传学) 基因表达 转染
• 年，卷（期）: 2006,（15）
• 所属期刊栏目: 前沿报道
• 页码范围: 1125-1130
• 页数: 6页
• 分类号: R73
• 字数: 4993字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5269.2006.15.002

摘要

目的:探讨原核增强子能否提高hTERT启动子的转录活性及对其肿瘤特异性的影响.方法:将增强子SV40、CMV分别或组合构建一系列GFP和荧光素酶报告基因载体,转染人肝癌、鼻咽癌、宫颈癌、结直肠癌细胞、成纤维肉瘤和正常成纤维细胞,流式细胞仪计数和双荧光酶分析系统检测基因的表达效率.结果:在正常成纤维细胞中这些载体均不能有效表达;而在肿瘤细胞中hTERT启动子能介导基因表达但效率不高,增强子能使基因表达增强3～26倍,特别是单独CMV增强子和SV40-CMV双增强子使荧光素酶表达提高20～26倍,是常用的CMV增强子/启动子的2～7倍;完整CMV增强子/启动子对hTERT启动子的活性影响因不同细胞而异.结论:增强子能显著增强hTERT启动子的转录活性并对其肿瘤特异性没有影响,CMV增强子或SV40-CMV双增强子/hTERT启动子是高效特异的通用调控元件,用于靶向性肿瘤基因治疗具有巨大潜力.