人源LL-37杀菌多肽的改建及原核细胞中表达

• 作者: 刘友生 杨艳丽 葛晓冬 邹佳
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人源杀菌肽LL-37 蛋白质融合表达 强离子交换层析
• 年，卷（期）: 2006,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 636-639
• 页数: 4页
• 分类号: Q516|Q591.2|Q78
• 字数: 3750字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.07.006

摘要

目的改良人源杀菌肽LL-37的氨基酸序列,提高其杀菌力,并在原核细菌中表达.方法应用蛋白质分析软件(Anthepro 5.0、SWISS-MODEL等),对人源杀菌肽LL-37的氨基酸序列进行二维、三维结构及理化特性分析,将其中部分氨基酸残基进行替换,提高其正电荷,并以人源杀菌肽LL-37的基因序列为模板,进行相应的DNA序列替换,转入表达载体pET-28a(+)于杆菌BL21(DE3)中表达、纯化,并初步研究其抗菌性.结果在维持LL-37空间构象不变的基础上,将Glu16、Asp26、Glu36分别替换为Gln16、Asn26、Gln36,其静电荷由pH 7.4时的+5.8提高到+9.0,并且其多肽N端疏水、C端亲水的特性不变.通过Touch-Down PCR法,成功获得改良LL-37多肽的DNA序列,并将重组质粒pET-28a(+)-rLL-37在杆菌BL21(DE3)中表达,改良LL-37多肽成功由强离子交换柱芯Macro-Prep High S纯化,并对G+、G-菌具有一定的抗菌力.结论将杀菌肽LL-37多肽进行氨基酸残基替换并以原核细胞进行融合型表达是可行的,为改良LL-37的大量制备及杀菌活性研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘友生	第三军医大学西南医院病理研究所	84	357	10.0	13.0
2	葛晓冬	第三军医大学西南医院病理研究所	19	68	4.0	7.0
3	邹佳	第三军医大学西南医院病理研究所	7	22	3.0	4.0
4	杨艳丽	第三军医大学西南医院病理研究所	7	22	3.0	4.0