摘要:
目的:在帕金森病鼠纹状体内移植孕14~18 d同种胎鼠中脑细胞,观察植入细胞对纹状体感觉门控的影响及对大鼠旋转行为的改善.方法:①实验于2004-04/2005-05在昆明医学院生理教研室神经生理室完成.取孕龄14~18 d的SD胚胎鼠,无菌条件下分离出中脑腹侧区组织,调整细胞浓度为1×1011 L-1,取细胞成活率大于85%的细胞悬液用于移植.②选取3月龄健康成年雌性SD大鼠25只,制备帕金森病模型,于纹状体内埋置记录电极,坐标为AP:-0.8mm,ML:2.6 mm,DV:4.2 mm.25只模型大鼠皮下注射阿朴吗啡1 mL/kg,以雌鼠首尾相接向损伤对侧旋转360°为1圈,定向旋转大于7 r/min、持续时间大于30 min为帕金森病模型成功的标志,未达到标准的动物舍弃不用.共17只造模成功,随机数字表法分成两组:中脑细胞移植组12只、DMEM培养液移植组5只.③中脑细胞移植组注入已制备好的中脑腹侧细胞悬液,每点注射3 μL,注射速度为0.5 μL/min,注射完毕留针5 minDMEM培养液移植组按同方法操作,每点注射DMEM培养液3μL.④记录清醒、自由活动状态下帕金森病鼠纹状体感觉门控的变化,以第2个声音诱发的峰-峰值/第1个声音诱发的峰-峰值(T/C)作为评价指标,并观察帕金森病鼠旋转行为的改变.结果:实验选取25只成年雌性SD大鼠进行造模,共17只造模成功而进入结果分析.①胎鼠中脑细胞移植对帕金森病大鼠纹状体感觉门控的影响:中脑细胞移植组大鼠移植后第3~19天,纹状体感觉门控的T/C值较DMEM培养液移植组明显增大(66.74±11.83,43.23±7.99,P<0.05).而第21~27天中脑细胞移植组纹状体感觉门控的T/C值明显减小,两组基本相似(46.28±9.86,43.23±7.99,P>0.05).②帕金森病大鼠旋转行为的评价结果:与移植前比较,DMEM培养液移植组大鼠于移植后第3,6,10,14,21,28天的旋转行为未见改善(P>0.05);中脑细胞移植组移植后第1周其旋转行为亦无明显变化(P>0.05),但第9~21天大鼠的旋转行为明显改善[(5.32±1.56)r/min,(8.78±2.19)r/min,P<0.05],第24天起大鼠每分钟的旋转次数出现逆转,为(8.33±2.19)r/min,与移植前基本相似(P>0.05).结论:①接受胎鼠中脑细胞移植的帕金森病鼠,在一定时间内可使纹状体感觉门控的T/C值显著回升,且21 d内可显著改善帕金森病鼠的旋转行为.②黑质-纹状体多巴胺系统功能的修复与多巴胺能神经元及其存活状况有关,移植较成熟的胚胎中脑细胞可使该系统功能的修复提前.