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摘要:
目的 构建增强绿色荧光蛋白(EGFP)-人乳头瘤病毒16型变异株E7(HPV16-HBE7)重组质粒pEGFP-HBE7,研究HPV16-HBE7蛋白亚细胞定位,为进一步了解其生物学功能奠定基础.方法 采用分子克隆技术,将HPV16-HBE7基因克隆在pEGFP-C1表达载体上,用脂质体法导入宫颈癌细胞中;West-ern印迹检测HBE7蛋白的表达;同时借助免疫荧光技术和EGFP-融合蛋白技术,采用激光共聚焦显微镜观察HBE7蛋白的亚细胞定位.结果 重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定,其目的片段大小、插入位点和核苷酸序列完全正确;结果表明,转染细胞HBE7蛋白的相对表达量其胞浆明显多于胞核;各个时间段HBE7蛋白均以胞浆分布为主,绿色荧光密集点状分布于细胞浆内,而野生株E7(WE7)蛋白分布在核内.结论 人乳头瘤病毒16型变异株E7蛋白主要分布在细胞浆内,以胞浆为主的分布可能和HBE7基因发生突变后丢失核定位信号有关.
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文献信息
篇名 人乳头瘤病毒16型变异株E7蛋白在HeLa细胞中的表达及亚细胞定位
来源期刊 医学分子生物学杂志 学科 医学
关键词 人乳头瘤病毒 人乳头瘤病毒16型变异株E7 亚细胞定位 核定位信号 激光共聚焦
年,卷(期) 2007,(1) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 1-5
页数 5页 分类号 R3
字数 3439字 语种 中文
DOI 10.3870/j.issn.1672-8009.2007.01.001
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 赵旻 武汉大学医学院病毒学研究所分子病毒学研究室 39 136 5.0 9.0
2 姚军 武汉大学医学院病毒学研究所分子病毒学研究室 7 15 2.0 3.0
3 俞娟 武汉大学医学院病毒学研究所分子病毒学研究室 5 3 1.0 1.0
4 左泽华 武汉大学医学院病毒学研究所分子病毒学研究室 10 24 3.0 3.0
5 刘金花 1 1 1.0 1.0
6 许蓓妮 武汉大学医学院病毒学研究所分子病毒学研究室 2 3 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
人乳头瘤病毒
人乳头瘤病毒16型变异株E7
亚细胞定位
核定位信号
激光共聚焦
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
医学分子生物学杂志
双月刊
1672-8009
42-1720/R
大16开
武汉市航空路13号
38-35
1978
chi
出版文献量(篇)
2127
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4
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8829
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