B-NHL患者NK细胞中CD16ζ表达及利妥昔单抗与LAK细胞的联合抗瘤作用

• 作者: 史艳侠 夏建川 姜文奇 张晓实 张景航 徐瑞华 李永强 管忠震 韩文杰
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 利妥昔单抗 LAK细胞 免疫治疗 淋巴瘤
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 837-842
• 页数: 6页
• 分类号: R737.14
• 字数: 5084字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467x.2007.08.007

摘要

背景与目的:自然杀伤细胞(nature killer cell,NK)是抗体依赖细胞介导的细胞毒作用的主要效应细胞,肿瘤患者普遍存在NK细胞活化功能的缺陷可能会影响单克隆抗体的治疗效果.因此如能逆转NK细胞的CD16ζ链信号转导的功能缺陷,并与单克隆抗体联合免疫治疗,可能会产生协同抗肿瘤作用.本研究的目的是了解B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-cell non-Hodgkin's lymphoma,B-NHL)患者是否存在NK细胞的活化障碍,体外白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)是否能完全逆转其活化障碍,并观察利妥昔单抗与LAK细胞联合对肿瘤细胞的杀伤作用.方法:使用密度梯度离心方法分别分离69例B-NHL患者和30例健康志愿者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),将两种PBMC在体外与1 000 U/ml IL-12共同培养制备LAK细胞,流式细胞仪检测PBMC和LAK细胞中CD16ζ链的阳性率和平均荧光强度.流式细胞仪检测Raji细胞表面CD20的表达;Annexin V/PI方法检测利妥昔单抗单药对Raji细胞的促凋亡作用,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放实验进行杀伤活性的检测.结果:在B-NHL组和健康对照组,CD56+细胞表达CD16ζ链的阳性率为(63.3±16.4)%、(97.8±3.1)%(P＜0.001),CD16ζ链MFI值分别为1.3±1.3和3.6±1.7(P＜0.001).在体外1 000 U/ml的IL-2共培养的LAK细胞中,两组CD16ζ链的阳性率分别为(99.3±4.1)%和(99.7+3.9)%,其MFI值分别为29.2±12.5和31.4±13.8,均无显著性差异(P=0.15和P=0.44).40 μg/ml利妥昔单抗可以完全结合细胞表面CD20抗原,在24 h时才开始出现对Raji细胞的明显的凋亡作用.利妥昔单抗与LAK细胞联合对Raji细胞的杀伤率在不同的浓度组均明显高于不加利妥昔单抗组(P＜0.05).LAK细胞与Herceptin(40 μg/ml)联合的杀伤率与不加Herceptin组相比,在各效靶比浓度梯度均无明显提高(P＞0.05).LAK细胞与利妥昔单抗联合对Jurket细胞的杀伤率在各效靶比浓度梯度均与不加利妥昔单抗组无显著性差异(P＞0.05).结论:B-NHL患者普遍存在NK细胞CD16ζ链的表达下调,高剂量的IL-2可以显著增强CD16ζ链的表达,利妥昔单抗与LAK细胞联合可增强对Raji细胞的抗肿瘤作用.