检测和鉴别犬瘟热病毒强、弱毒株的复合反转录-套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)的建立及初步应用

• 作者: 刘立奎 司微 崔尚金 张洪英
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 犬瘟热病毒 复合反转录-套式聚合酶链式反应 鉴别诊断
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 诊断技术
• 页码范围: 222-226
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65|Q781
• 字数: 4216字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2007.03.015

摘要

根据GenBank上登录的犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)基因组全序列,选择CDV强、弱毒株间有区别保守区设计了一对通用引物P1和P4,并在该对引物跨越区域的内部设计了CDV强毒株特异性引物P2及弱毒株特异性引物P3,用引物P1/P4进行RT-PCR,然后用引物P2/P3/P4进行复合套式PCR,建立了一种能区分CDV强、弱毒株的复合反转录-套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)的鉴别诊断方法.应用该方法从CDV强、弱毒株的基因组中分别扩增出了大小为247 bp和177 bp的特异性片段,从两种病毒基因组混合物中扩增出了大小为247 bp和177 bp的两条特异性片段,与犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒、狂犬病病毒、新城疫病毒的细胞培养物以及正常细胞对照组进行复合RT-nPCR扩增时均为阴性.对从黑龙江省和吉林省采集的20份疑似CDV病料进行的检测结果表明,有15份类似CDV强毒,5份类似CDV弱毒.本研究建立的复合RT-nPCR可以有效检测CDV感染,能够将强、弱毒株区分开,可用于临床快速检测、流行病学监测以及追踪疫苗免疫效果等.