一种载体构建的新方法:一步克隆法

• 作者: 严红 李玉 欧阳平 马立新
• 来源期刊: 湖北大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 载体构建 一步克隆 新方法 同源片段 水稻
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 178-181
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2611字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2375.2007.02.021

摘要

报道一种载体构建的新方法,在PCR引物设计时,相连片断设计15 bp同源序列,PCR克隆目的片段后,产生多个首尾具同源末端的片段,然后进行多片段定向连接、转化和重组子鉴定.以4片段拼接的叶绿体单交换质体载体pSMGA(pBluescript Ⅱ SK(+)-man-gfp-aadA)的构建为例,应用上述方法构建仅需做一次连接、转化即可.该方法设计操作相对简便,无需中间载体的构建,减少连接和转化次数.利用该法构建了10多个6 kb以内的载体,证明这是一种简便、通用、高效并值得推广的构建小载体的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马立新	湖北大学微生物与基因工程省重点实验室	77	616	14.0	21.0
2	严红	湖北大学微生物与基因工程省重点实验室	5	54	3.0	5.0
3	李玉	湖北大学微生物与基因工程省重点实验室	2	25	1.0	2.0
4	欧阳平	湖北大学微生物与基因工程省重点实验室	1	25	1.0	1.0