利用套式PCR技术鉴别屋尘螨和粉尘螨主要变应原基因及其在尘螨疫苗研制中的应用

• 作者: 刘志刚 包莹 吉坤美 李盟 白羽
• 来源期刊: 寄生虫与医学昆虫学报
• 学科: 医学
• 关键词: 尘螨 Der p1 Der f1 套式PCR 疫苗
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 著述
• 页码范围: 34-39
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 5064字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-0507.2007.01.008

摘要

通过提取屋尘螨和粉尘螨疫苗研制用的原始种子和生产种子基因组DNA作模板,分别设计Der p1和Der f1各2套内外扩增引物并进行一步法套式PCR,根据扩增出目的片段来检测尘螨变应原Der p1和Der f1基因片段,并以培养基提取物为阴性对照和已通过形态学鉴别为纯屋尘螨、纯粉尘螨的基因组DNA为阳性对照.PCR产物经电泳后切胶回收并克隆到T载体上,进行DNA序列分析并在GenBank中进行同源性比较.结果显示,从屋尘螨和粉尘螨疫苗研制用的原始种子和生产种子分别扩增出含有屋尘螨和粉尘螨主要变应原Der p1和Der f1基因片段,扩增部分的序列与GenBank数据库里相应序列同源性为100%.从阴性对照提取物中未扩增得到目的基因片段,从阳性对照DNA提取物中能扩增得到目的变应原Der p1和Der f1基因片段.本研究首次应用套式PCR技术鉴别了屋尘螨和粉尘螨原始种子和生产种子,为尘螨疫苗研制以及工业化生产提供了一种有效的质量控制手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘志刚	深圳大学生命科学学院	324	1724	17.0	23.0
2	吉坤美	深圳大学生命科学学院	32	237	10.0	13.0
3	白羽	深圳大学生命科学学院	6	43	5.0	6.0
4	李盟	深圳大学生命科学学院	14	111	6.0	10.0
5	包莹	深圳大学生命科学学院	7	51	5.0	7.0