标准化粉尘螨变应原脱敏疫苗中主要变应原Der f 2含量测定

• 作者: 刘志刚 刘晓宇 吉坤美 唐艳 詹政科
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 尘螨过敏原 Der f 2 单克隆抗体 夹心ELISA
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 663-667
• 分类号: R384.4
• 字数: 4570字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.07.012

摘要

目的 研制粉尘螨Ⅱ组变应原Derf 2单克隆抗体(Monoclonal Antibody, McAb),并建立双单抗夹心ELISA检测方法,测定标准化粉尘螨变应原脱敏疫苗中Der f 2的含量.方法 应用基因工程方法获得粉尘螨变应原Der f 2重组蛋白并通过亲和层析纯化,再免疫小鼠,利用间接ELISA筛选获得McAb杂交瘤细胞株并纯化、鉴定抗体的特异性;用一株单抗包被酶标板,同时用生物素标记另一株单抗,从而建立双单抗体夹心ELISA法;并用此法测定粉尘螨变应原脱敏疫苗中Der f 2的含量.结果 成功地获得了一株单抗3B12与屋尘螨抗原具有交叉反应,另外一株单抗3G7与屋尘螨抗原没有交叉反应,并建立了双单抗夹心ELISA 方法测定Der f 2的含量,其方法的检测限为0.5ng/mL,并在6.25ng/mL-300ng/mL范围内线性良好;标准化粉尘螨变应原脱敏疫苗中Der f 2的含量为100ng/10000BAU.结论 成功制备了高效价抗Der f 2 单抗,并建立了双抗体夹心ELISA检测方法.该方法具有很高的灵敏度,可以测定标准化粉尘螨变应原脱敏疫苗中主要变应原Der f 2含量,为临床应用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘晓宇	深圳大学生命科学学院	42	160	7.0	11.0
2	吉坤美	呼吸疾病国家重点实验室深圳大学变态反应分室	3	14	2.0	3.0
3	刘志刚	呼吸疾病国家重点实验室深圳大学变态反应分室	4	20	3.0	4.0
4	唐艳		1	2	1.0	1.0
5	詹政科	呼吸疾病国家重点实验室深圳大学变态反应分室	1	2	1.0	1.0