人骨髓间质干细胞中的端粒调控机制

• 作者: 余建 孙洁 曾芬芳 朱园园 李静远 来晓瑜 罗依 蓝建平 赵妍敏 黄河
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 间质干细胞 端粒,末端转移酶 细胞周期
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1737-1742
• 页数: 6页
• 分类号: R394.3
• 字数: 5177字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2007.09.018

摘要

目的:研究人骨髓来源间充质干细胞(MSCs)端粒长度的调控机制.方法:以贴壁培养法从人骨髓中分离MSCs并用MSCs及造血干细胞相关表面抗体作表型鉴定,用Southern blotting检测MSCs的端粒长度;应用免疫荧光染色技术检测端粒重复序列结合因子1(TRF1)和早幼粒细胞白血病蛋白小体(PML)的定位;以端粒重复序列扩增法(TRAP)和/或Western blotting法检测传代及分化成脂肪细胞的MSCs和经同步化处理被阻断在S期的MSCs的端粒酶表达.结果:与端粒酶阴性ALT细胞株WI-38-2RA细胞相比,MSCs的端粒长度较短并且端粒长度变异度不大;端粒调控相关蛋白TRF1和PML在MSCs中的定位则与端粒酶阳性细胞HeLa细胞相同,两者呈非共定位,而在端粒酶阴性WI-38-2RA细胞中两者呈共定位状态.MSCs中不存在有染色体外端粒重复序列DNA(ECTR DNA).TRAP法检测传代培养的MSCs端粒酶呈阴性表达,但分化成脂肪的MSCs端粒酶呈阳性表达.Western blotting 检测同步化处理前MSCs端粒酶呈微弱表达,经同步化处理被阻断在S期时,MSCs的端粒酶表达明显增高,并且与S期的细胞比例呈正相关.结论:MSCs中不存在ALT相关的早幼粒细胞白血病蛋白小体(APBs)、染色体外端粒重复序列DNA(ECTR DNA)和端粒长度较长、端粒长度变异度大等ALT机制相关分子特征;非同步化在S期处理的MSCs,端粒酶呈微弱表达,但诱导向脂肪细胞分化或处在S期时,MSCs的端粒酶表达明显增高,并且与S期的细胞比例呈正相关.本研究提示MSCs是通过端粒酶机制而不是端粒延长旁路途径(ALT)机制调控其端粒末端.