MBL突变体在CHO细胞中表达及其产物分析

• 作者: 刘凤玲 张丽芸 蔡学敏 赵娜 陈政良
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 甘露聚糖结合凝集素 GGC54GAC突变体 54Asp突变MBL蛋白 结构 活性
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 188-192
• 页数: 5页
• 分类号: R392.3
• 字数: 4681字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2007.03.003

摘要

采用PCR技术,从质粒pMBLm54中获得含GGC54GAC点突变的甘露聚糖结合凝集素(MBL)基因,将其插入真核表达载体构建重组表达载体pcDNA4/HisMax C-MBLm54,DNA测序验证序列正确后将其电转染入CHO细胞.以Zeocin筛选并维持培养转染后CHO细胞,获得2株稳定高效表达目的蛋白的单克隆细胞株.采用Ni2+-NTA agarose层析柱纯化表达产物,获得54Asp突变MBL蛋白.SDS-PAGE和Western blot分析表明,54Asp突变MBL蛋白主要为相对分子质量为 60 000的成分,而重组野生型MBL蛋白则主要是相对分子质量为 200 000和＞200 000的分子.配体结合试验发现,天然MBL和重组野生型MBL能与甘露聚糖结合,而54Asp则否.结果表明,54Asp突变MBL蛋白不能形成正常的MBL结构单位和寡聚体,并进而影响其配体结合活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张丽芸	南方医科大学免疫学教研室	39	195	8.0	11.0
2	陈政良	南方医科大学免疫学教研室	68	338	10.0	13.0
3	赵娜	南方医科大学免疫学教研室	7	41	5.0	6.0
4	刘凤玲	南方医科大学免疫学教研室	5	24	4.0	4.0
5	蔡学敏	南方医科大学免疫学教研室	5	31	4.0	5.0