双表达外源性4-1BBL/IL-15的K562细胞活化外周血淋巴细胞的研究

• 作者: 万兵 刘丹 季明春 曹正锋 王丽珩 龚卫娟
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 4-1BBL IL-15 K562 表达 活化
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 12-17
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 4946字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2007.01.003

摘要

为肿瘤过继免疫治疗开发体外激活T细胞、NK细胞的高效途径,研究双表达外源性4-1BBL和IL-15的K562细胞刺激外周血淋巴细胞活化的能力.采用分子克隆技术,分别将4-1BBL和IL-15基因插入双表达载体pVITRO-2,命名为pV4-1BBL-IL-15.经测序鉴定后,利用脂质体介导的转染及潮霉素筛选,获得稳定双表达4-1BBL、IL-15分子的K562细胞(K562/4-1BBL/IL-15).经流式细胞仪(FACS)分选后,K562/4-1BBL/IL15细胞和K562细胞分别用丝裂霉素C处理,与外周血淋巴细胞孵育24 h,FACS检测淋巴细胞表面活化性受体CD69的表达.对NK细胞不仅同时检测活化性受体NKG2D的表达,还用乳酸脱氢酶释放法观察NK细胞受不同刺激细胞作用后,细胞毒活性的变化.结果显示受K562/4-1BBL/IL15细胞刺激后,T细胞CD69的表达无明显变化.γδT细胞CD69表达增长5倍.NK细胞CD69表达增长6倍,而NKG2D的表达增加1.5倍;NK细胞受K562/4-1BBL/IL15细胞作用72 h后,细胞毒活性明显提高.提示双表达4-1BBL/IL-15的K562细胞能够高效激活γδT细胞及NK细胞,有望用于肿瘤的过继免疫治疗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	季明春	扬州大学医学院病原生物学和免疫学教研室	80	256	7.0	12.0
2	万兵	扬州大学医学院病原生物学和免疫学教研室	7	71	4.0	7.0
3	龚卫娟	扬州大学医学院病原生物学和免疫学教研室	81	302	10.0	13.0
4	王丽珩	扬州大学医学院病原生物学和免疫学教研室	5	5	2.0	2.0
5	刘丹	扬州大学医学院病原生物学和免疫学教研室	14	22	2.0	3.0
6	曹正锋	扬州大学医学院病原生物学和免疫学教研室	1	2	1.0	1.0