黄曲霉毒素G1对体外原代培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响

• 作者: 严霞 吕平 张祥宏 王俊灵 申海涛 邢凌霄 邢欣
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 黄曲霉毒素类 肺泡 上皮细胞 表面活性蛋白C
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 99-106
• 页数: 8页
• 分类号: R996.1
• 字数: 6270字
• 语种: 英文

摘要

目的 进一步研究黄曲霉毒素G1(AFG1)对可能作用的靶细胞SD大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AT-Ⅱ)损伤的生物学作用.方法 以酶消化法原代培养SD大鼠AT-Ⅱ,纯化后培养36 h,分别给予不同浓度(0.5,1.0 和2.0 mg·L-1)的AFG1处理.AFG1作用24 h后,收集细胞和培养基上清液及细胞爬片,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率、生物化学方法检测细胞培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)和碱性磷酸酶(AKP)活力、透射电镜方法观察AT-Ⅱ超微结构的改变、激光扫描共聚焦显微镜(CLSM )检测Fluo-3/AM负载细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)、免疫细胞化学、CLSM及流式细胞术(FCM)方法检测AT-Ⅱ特异分化标志物肺表面分泌蛋白C(SP-C )表达情况.结果 给予不同浓度AFG1处理后,体外培养AT-Ⅱ细胞存活率分别为(88±3)%,(80±9)%和(72±8)%,明显低于溶剂对照组(101±2)%(n=6,P＜0.01);培养上清液中LDH和AKP活力明显增高;透射电镜观察可见上皮细胞板层小体出现空化,线粒体肿胀、空泡化等损伤性变化.CLSM结果显示,AFG1 0.5,1.0 和2.0 mg·L-1处理组,AT-Ⅱ细胞内平均钙离子荧光强度分别为200±21,225±14和229±12,明显高于溶剂对照组161±28 (n=6,P＜0.01) ,有明显浓度依赖关系(r=0.849);免疫细胞化学、CLSM及FCM检测结果显示AFG1处理组AT-Ⅱ SP-C蛋白表达明显低于溶剂对照组.结论 AFG1对体外培养的大鼠AT-Ⅱ具有明显致损伤作用,同时增加细胞[Ca2+]i、降低SP-C蛋白的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕平	河北医科大学基础医学研究所病理研究室	15	60	5.0	7.0
2	申海涛	河北医科大学基础医学研究所病理研究室	9	83	7.0	9.0
3	邢凌霄	河北医科大学基础医学研究所病理研究室	37	344	10.0	16.0
4	张祥宏	河北医科大学基础医学研究所病理研究室	127	1035	17.0	24.0
5	严霞	河北医科大学基础医学研究所病理研究室	52	561	16.0	20.0
6	邢欣	河北医科大学基础医学研究所病理研究室	18	106	6.0	9.0