NGF及其活化受体p-TrkA在人脑胶质瘤细胞株U251细胞周期中的多靶点分布模式

• 作者: 于婷 孙湘兰 崔颜宏 张志坚 徐希明 杨勇 步雪峰 肖德生 陈永昌 龚爱华
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经生长因子 酪氨酸蛋白激酶A 人脑胶质瘤 细胞周期 多靶点分布模式 靶向药物
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 577-586
• 页数: 10页
• 分类号: R73
• 字数: 4311字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7547.2007.06.003

摘要

为了探讨神经生长因子(NGF)及其活化受体磷酸化的酪氨酸蛋白激酶A(p-TrkA)在人脑胶质瘤细胞株U251细胞周期中的多靶点分布模式及其生物学意义,采用免疫荧光双标记技术对处于细胞周期不同时相细胞内的NGF和p-TrkA的动态分布进行亚细胞定位,并观察了抗癌药物羟基脲、紫杉醇和秋水仙素及抗NGF-β中和血清对NGF和p-TrkA在细胞分布的影响;用免疫印迹技术检测细胞核和细胞质内NGF和p-TrkA的相对含量以及细胞培养液内的分泌性NGF.免疫荧光染色结果表明:分裂相细胞在重新贴壁生长6 h后,NGF主要分布于核周区,p-TrkA主要定位于细胞膜;培养12 h后,NGF和p-TrkA共同转位至细胞核内;在M期,NGF主要定位于中心体,p-TrkA主要定位于纺锤丝;用羟基脲将细胞阻滞于G1/S期后,NGF和p-TrkA主要积聚在细胞核内;用紫杉醇或秋水仙素处理后,NGF与γ-Tubulin仍然共定位于中心体,p-TrkA与α-Tubulin共定位于异形纺锤丝上或弥散分布于细胞质内.用兔抗人NGF-β抗血清中和培养基中分泌性的NGF后,细胞内NGF和p-TrkA免疫荧光强度明显减弱.免疫印迹结果显示:G1/S期细胞核内的NGF和p-TrkA蛋白条带明显浓于细胞质内的蛋白条带.上述结果提示:人脑胶质瘤U251细胞高表达NGF及其高亲和力受体TrkA,并将NGF分泌至细胞外;胞外NGF与细胞膜上TrkA结合后形成NGF/p-TrkA复合物内化入胞内;NGF/p-TrkA在细胞内的分布具有细胞周期性特征;NGF/p-TrkA可通过多靶点作用模式调控U251细胞的生物学行为.上述多靶点分布模式为研制NGF修饰的抗肿瘤靶向药物提供了细胞生物学基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐希明	江苏大学药学院	75	695	14.0	23.0
2	张志坚	江苏大学医学院	129	596	12.0	16.0
3	龚爱华	江苏大学医学院	77	261	10.0	13.0
4	孙湘兰	江苏大学科学研究院	16	48	4.0	6.0
5	步雪峰	江苏大学医学院	33	106	6.0	9.0
6	肖德生	江苏大学医学院	33	252	11.0	14.0
7	杨勇	江苏大学医学院	24	132	7.0	11.0
8	于婷	江苏大学医学院	1	11	1.0	1.0
9	崔颜宏	江苏大学医学院	1	11	1.0	1.0