交联抗人DR5单抗-YM366EC诱导Jurkat细胞凋亡机制研究

• 作者: 刘广超 李淑莲 杜耀武 王雪垠 王靖 白慧玲 马远方
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 交联 Jurkat细胞 抗DR5抗体 凋亡 流式细胞术 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫学
• 页码范围: 789-792,797
• 页数: 5页
• 分类号: R392.1
• 字数: 4618字
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的死亡受体5(DR5)单抗-YM366EC引起Jurkat细胞凋亡信号传导通路,阐明抗DR5抗体的抗肿瘤效应机制,为相关肿瘤治疗提供依据.方法:光镜下观察交联366EC作用下Jurkat细胞形态变化,并利用MTT法检测Jurkat细胞的增殖,利用FITC-Annexin V及PI标记流式细胞仪检测交联YM366EC对Jurkat细胞凋亡率影响.进一步用Western blot法检测交联YM366EC作用于Jurkat细胞2、4、6、8、10、12小时时Bcl-2、Cyt-C、Bax、caspase3、caspase9的表达变化.结果:DR5抗体YM366EC单独应用无凋亡作用,但应用抗小鼠IgG交联366EC后可致Jurkat细胞染色质边集、断裂,细胞出芽,凋亡小体形成,并可直接诱导TRAIL敏感的Jurkat细胞凋亡改变.Western blot检测到随着抗体诱导时间的延长Jurkat细胞Bcl- 2蛋白表达减少;Cyt-C、Bax、有活性的caspase3和caspase9蛋白的表达增加.结论:交联抗DR5抗体YM366EC对Jurkat细胞增殖有明显的抑制作用,诱导的Jurkat细胞凋亡的分子机制涉及到Cyt-C、Bax、caspase3、caspase9.