抗FLAG标签单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

• 作者: 李晨阳 李玉林 王云龙 王真 闵玉涛
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: FLAG标签 单克隆抗体 免疫亲和层析
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 93-97
• 页数: 5页
• 分类号: Q81
• 字数: 3591字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2007.01.017

摘要

碳化二亚胺法合成FLAG-BSA完全抗原,利用杂交瘤技术制备5株分泌抗FLAG标签单克隆抗体的杂交瘤细胞株.制备腹水,并对其进行纯化、分析和鉴定.制备交联抗FLAG mAb亲和层析柱,纯化带FLAG标签的融合蛋白,经SDS-PAGE电泳后薄层扫描分析纯度,用Western-blotting检测mAb对融合蛋白的反应性.结果表明:5株细胞分泌的单抗都为IgG类型、IgG1亚类,腹水效价均高于1:106,且5株单抗与其它融合蛋白标签无交叉反应性;亲和层析纯化后蛋白纯度达85%以上,5株单抗均可用于融合蛋白的Western-blotting检测,建立了可用于FLAG融合蛋白纯化和检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王云龙		47	252	9.0	13.0
2	李玉林		35	123	7.0	9.0
3	闵玉涛		2	12	1.0	2.0
4	李晨阳		6	50	5.0	6.0
5	王真		1	11	1.0	1.0