超嗜热菌Aquifex aeolicus亮氨酰-tRNA合成酶和tRNALeu的相互作用

• 作者: 王恩多 赵明炜
• 来源期刊: 中国科学院研究生院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 亮氨酰-tRNA合成酶 tRNALeu 氨基酰化反应 编校反应 CP1结构域
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 优秀博士论文
• 页码范围: 131-136
• 页数: 6页
• 分类号: Q81
• 字数: 1088字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-1175.2007.01.020

摘要

超嗜热菌Aquifex aeolicus亮氨酰-tRNA合成酶(αβ-LeuRS)是已知的唯一的双肽链LeuRS.通过αβ-LeuRS和大肠杆菌LeuRS相应肽段的重组和重组酶性质的研究发现,αβ-LeuRS的α亚基C末端36个氨基酸对于αβ-LeuRS的氨基酰化活力至关重要.αβ-LeuRS的两个亚基人为融合得到的单亚基酶SLeuRS-αβ,具有完全的野生型双亚基酶活力,其热稳定性显著增强.同时,通过亚基重组揭示了LeuRS对于不同种属的tRNALeu的识别元件位于α亚基内,而其中的CP1结构域不仅是LeuRS行使编校功能的结构基础,对于LeuRS识别不同种属来源的tRNALeu也是十分重要的.通过不同来源的LeuRS一级结构比较,克隆了单独的CP1结构域组成的肽(CP1),发现唯有A.aeolicus αβ-LeuRS的CP1对错误的氨基酰化产物具有体外编校功能.它与其他3种来源于细菌keuRS的CP1都能够编校误氨基酰化的古老形式的亮氨酸小螺旋(minihelixLeu).通过同源序列比较发现,在αβ-LeuRS的CP1内存在一个由20个氨基酸组成的特异的结构模体,它对CP1发挥体外编校功能必不可少,引入原本不具有体外编校功能的E.coli的CP1后则可使其获得编校功能,但是该模体不影响全酶的编校功能.αβ-LeuRS中与tRNA结合有关的亚基--β亚基也可以赋予E.coli CP1编校功能.这些研究结果充分表明,来源于古老的超嗜热菌A.aeolicus的αβ-LeuRS保留了进化的遗迹--具有编校活力的CP1和与其编校功能密切相关的由20个氨基酸组成的特异的结构模体,它们在进化过程中随着其他结构域招募进合成酶中而逐渐失去了对全酶编校功能的作用.这一发现有力地支持了aaRS通过纳入新的结构域以加速进化过程的理论,并且也从不同角度为aaRS/tRNA共进化理论提供了可靠的依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王恩多	中国科学院上海生命科学研究院生化细胞所国家分子生物学重点实验室	30	180	5.0	13.0
2	赵明炜	中国科学院上海生命科学研究院生化细胞所国家分子生物学重点实验室	1	0	0.0	0.0