抗人树突状细胞单克隆抗体可变区基因克隆和序列分析

• 作者: 刘恭植 吕连峥 沈关心 王胜军 蔺昕 许化溪 邵启祥
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 树突状细胞 McAb 可变区基因 克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 381-385
• 页数: 5页
• 分类号: R392.12
• 字数: 2968字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2007.05.005

摘要

目的:为了将抗树突状细胞(dendritic cells,DC)抗体应用于临床疾病治疗,计划克隆获得抗人DC单克隆抗体(McAb)的可变区序列,在此基础上进一步获得人源化的抗人DC抗体.方法:运用RT-PCR技术,从分泌抗人DC McAb的杂交瘤细胞株(H1E11)中,克隆出VH和VL基因片段,并对VH和VL进行了测序分析.所测得的重链和轻链在基因库中与相关的Ig的VH和VL基因序列进行经Blast同源性比较.结果:通过碱基和蛋白序列的比较确认为小鼠IgG的VH和VL基因.运用Dnasis软件对VH和VL基因进行阅读框分析和模拟翻译,并参照Kabat等人(1991)编写的Ig蛋白质编码序列图谱,根据其FRs和CDRs的序列特征进行Ig的家族分析,发现VH共有414 bp,编码138个氨基酸序列,属于小鼠IgG重链Ⅲ(A)家族;VL由396 bp编码,产生132氨基酸,属于轻链κV家族.结论:成功克隆抗人DC McAb重链和轻链的可变区.