丝状霉形体山羊亚种血清抗体间接ELISA检测方法的建立

• 作者: 储岳峰 石琴 贺英 赵萍 逯忠新 高鹏程
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 间接ELISA 丝状霉形体山羊亚种 血清抗体
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 859-862
• 页数: 4页
• 分类号: S852.62|R446.61
• 字数: 3326字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.10.009

摘要

利用丝状霉形体山羊亚种标准株PG3制备抗原,经纯化后作为包被抗原建立了间接ELISA方法,用于检测丝状霉形体山羊亚种血清抗体.经方阵滴定确定最佳抗原包被浓度为1.09μg/mL,血清样品最佳稀释度为1∶64,兔抗羊IgG辣根过氧化物酶结合物的最佳稀释度为1∶40 000,抗原抗体最佳结合时间为1 h.判定标准为样品D490 nm值与标准阴性血清D490 nm值之比(P/N)≥3为阳性,≤2.5为阴性,介于二者之间的为可疑.重复性和稳定性试验证明,建立的间接ELISA的稳定性和重复性良好,与间接血凝试验相比,其敏感性较高.