水稻土总微生物RAPD扩增条件的优化

• 作者: 余彬彬 李钧敏 金则新
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 水稻土 微生物 RAPD 优化
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 土壤肥料
• 页码范围: 200-202
• 页数: 3页
• 分类号: Q939.5
• 字数: 2290字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-1302.2007.02.072

摘要

以改进的CTAB-溶菌酶-蛋白酶K裂解法抽提水稻土总微生物DNA,直接进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析.采用单因素试验分别测试了Mg2+浓度、4×dNTP浓度、模板DNA用量、引物用量、Taq DNA聚合酶用量及牛血清白蛋白(BSA)浓度对水稻土总微生物RAPD扩增的影响,确定了最适的RAPD反应体系为:10μlPCR反应体积,含1×Taq酶缓冲液(10 mmol Tris-HCl pH值9.0,50 mmol KCl,0.1%Triton X-100),0.8mmol/L4×dNTP,5.0 mmol/L MgCl2,0.75 U Taq DNA聚合酶,3 mg/ml BSA,5 ng模板DNA,5 pmol引物.