A组乙型溶血性链球菌DNaseB基因亚克隆及pET-28a(+)-DNaseB载体构建

• 作者: 潘琴 王滔 陈骏扬 黄祖新
• 来源期刊: 福建师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: A组乙型溶血性链球菌 DNaseB基因 亚克隆
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 页码范围: 97-101
• 页数: 5页
• 分类号: Q36
• 字数: 3166字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5277.2007.06.022

摘要

运用PCR扩增技术,以质粒pMD18-T-DNaseB为模板,扩增出0.5 kb截短的DNaseB基因,先将该基因片段与pMD19-T载体连接,确定该序列正确并进行大量繁殖后,再将DNaseB基因定向克隆入pET-28a(+)表达载体中,构建新的原核表达载体pET-28a(+)-DNaseB,转化该重组质粒至受体菌E.coliDH5a中,采用SDS碱裂解法提取该质粒DNA,经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定和核苷酸序列分析,证实插入的基因片段具有正确的DNaseB基因核苷酸序列,将pET-28a(+)-DNaseB转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经过IPTG诱导其目的蛋白得到了表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄祖新	福建师范大学生命科学学院	39	270	10.0	15.0
3	陈骏扬	福建省立医院儿科研究室	12	49	3.0	7.0
4	王滔	福建省立医院儿科	35	147	7.0	11.0
8	潘琴	福建师范大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0