一种改良的从LongSAGE标签中鉴定猪新基因的GLGI方法

• 作者: 刘榜 唐中林 李勇 李奎 樊斌 赵书红
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 长的基因表达序列标签 GLGI改良 新基因鉴定
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2007.01.004

摘要

将长的基因表达序列标签(LongSAGE)和结合标签的基因序列延伸(GLGI)技术相结合,对GLGI的方法进行改良.(1)将原始GLGI方法中正向引物中长为10 bp的SAGE标签特异序列改为17bp的LongSAGE标签;(2)针对不同LongSAGE标签,在PCR反应中给定相应不同的退火温度;(3)在PCR反应中用普通的DNA聚合酶代替高保真酶(Pfu);(4)在PCR反应的克隆中,使用普通的T载体和感受态细胞代替原始方法中特异的载体和感受态细胞.利用改良的GLGI方法分离的EST位于cDNA的3'末端并带有加尾信号和ploy(dA)尾巴.该方法在鉴定低丰度表达的基因时比普通的EST测序方法具有更高的灵敏性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘榜	华中农业大学动物遗传育种教育部重点实验室	59	610	14.0	22.0
2	赵书红	华中农业大学动物遗传育种教育部重点实验室	37	259	9.0	14.0
3	李奎	华中农业大学动物遗传育种教育部重点实验室	35	486	13.0	21.0
4	唐中林	华中农业大学动物遗传育种教育部重点实验室	26	110	7.0	9.0
6	樊斌	华中农业大学动物遗传育种教育部重点实验室	24	287	10.0	16.0
7	李勇	华中农业大学动物遗传育种教育部重点实验室	14	87	4.0	9.0