人脂肪组织来源内皮祖细胞的分离、培养及鉴定方法的实验研究

• 作者: 付全花 刘伟 刘广鹏 刘波 尹烁 崔磊 曹谊林 杨平 王豪夫 许志成
• 来源期刊: 中华整形外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人脂肪组织 内皮祖细胞 组织工程
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 62-65
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2866字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1009-4598.2007.01.019

摘要

目的 探讨人脂肪组织来源的内皮祖细胞的分离、培养及鉴定的方法.方法 脂肪抽吸术获取人体脂肪组织,消化法得到的细胞接种在Fibronectin包被的培养皿内,用含2%胎牛血清的DMEM培养,传至第2代,分诱导组(EGM-2,2%FBS,VEGF,bFGF等)和非诱导组(DMEM,2%FBS)两组进行培养.免疫细胞荧光分别检测两组的CD34、vWF和PECAM-1表达;流式细胞仪分别检测两组的CD34、CD45、CD133和PECAM-1表达率;荧光显微镜观察细胞摄取DiI-ac-LDL的功能;诱导组细胞接种于甲基纤维素半固体培养基进行三维培养,观察血管样结构形成情况.结果 诱导组细胞12 d后呈现内皮细胞典型的铺路石样形态,未诱导组细胞未观察到这种变化;免疫细胞荧光显示诱导组vWF、PECAM-1表达阳性,未诱导组细胞CD34表达阳性;流式细胞仪检测显示诱导组PECAM-1阳性率为(67.41±13.35)%,明显高于非诱导组的(6.73±2.21)%(P＜0.01),非诱导组CD34阳性率为(72.39±13.45)%,明显高于诱导组的(16.06±3.86)%(P＜0.01);荧光显微镜观察显示诱导组细胞具有摄取DiI-ac-LDL的功能;诱导组细胞三维培养形成"树枝样"分叉结构.结论 建立了一种从人脂肪组织分离、培养EPCs的方法,并对其表型进行鉴定,有望为血管组织工程提供新的种子细胞来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘伟	上海第九人民医院整复外科	5	49	2.0	5.0
2	崔磊	上海第九人民医院整复外科	3	47	2.0	3.0
3	刘波	上海第九人民医院整复外科	1	0	0.0	0.0
4	付全花	上海第九人民医院整复外科	1	0	0.0	0.0
5	杨平	上海第九人民医院整复外科	1	0	0.0	0.0
6	许志成	上海第九人民医院整复外科	1	0	0.0	0.0
7	尹烁	上海第九人民医院整复外科	1	0	0.0	0.0
8	王豪夫	上海第九人民医院整复外科	1	0	0.0	0.0
9	刘广鹏	上海第九人民医院整复外科	1	0	0.0	0.0