人真皮淋巴管内皮细胞的分离及冷冻保存

• 作者: 刘宁飞 胡学庆 蒋朝华
• 来源期刊: 上海交通大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 淋巴管内皮细胞 细胞培养 细胞冻存 细胞凋亡 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1092-1095
• 页数: 4页
• 分类号: Q813|R551.2
• 字数: 3906字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2007.09.016

摘要

目的 建立分离培养人真皮淋巴管内皮细胞(LECs)及其冷冻保存技术.方法 采用中性蛋白酶及胶原酶消化结合免疫磁珠方法,分选CD34-/CD31+细胞.所获内皮细胞进行体外培养,经免疫荧光染色、RT-PCR鉴定证实为LECs.采用梯度降温法冻存内皮细胞,经复苏后进行形态学观察, 以台酚蓝试验、MTT试验、流式细胞术细胞检测等方法鉴定细胞生物学特性.结果 中性蛋白酶及胶原酶消化方法结合免疫磁珠分选,可从真皮组织获取高纯度的LECs.与新鲜细胞相比,复苏的内皮细胞活力保持在92%以上.复苏后的内皮细胞形态学、生物学特性及生长曲线与新鲜细胞差异无统计学意义.冻存内皮细胞的凋亡率较新鲜内皮细胞高,为(9.15±0.34)% vs(5.31±0.23)%,但无统计学差异(P＞0.05).结论 中性蛋白酶及胶原酶消化结合免疫磁珠分选,可获取足够数量及纯度的LECs;冻存的内皮细胞复苏后无明显形态学改变,并保持较高的活力及体外增殖能力;可作为种子细胞来源,为淋巴管系统发育和新生研究提供方便.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘宁飞	上海交通大学医学院第九人民医院整复外科	21	112	6.0	9.0
2	蒋朝华	上海交通大学医学院第九人民医院整复外科	22	67	5.0	7.0
3	胡学庆	浙江大学医学院附属第二医院整形外科	16	78	5.0	8.0