土拨鼠肝炎病毒核心蛋白的高效表达和B细胞表位鉴定

• 作者: Ernst Schmid Melanie Fiedle Michael Roggendorf 张振华 徐飏 李磊 杨东亮 田拥军 陆蒙吉
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 土拨鼠肝炎病毒 核心蛋白 单克隆抗体 B细胞线性表位
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 549-554
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 4210字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2007.06.017

摘要

目的 建立高效表达土拨鼠肝炎病毒核心蛋白(WHcAg)的方法并对其B细胞表位进行鉴定.方法 分别构建不同截短型WHcAg的质粒以了解能大量表达并形成WHV核心颗粒的区段,利用变性WHcAg制备单克隆抗体以寻找能与WHcAg线性B细胞表位结合的单克隆抗体.结果 WHcAg前144或149氨基酸残基能够大量表达并能形成颗粒样结构.这2种截短型WHcAg能够在大肠杆菌中表达并组装成直径为34 nm的核心颗粒,最终纯化获得毫克级的核心蛋白.截短型WHcAg保留了全长WHcAg的抗原性,而且变性WHcAg存在另外的B细胞线性表位,利用变性WHcAg进行免疫制备单克隆抗体获得的5株抗体均针对WHcAg的N末端表位,该表位在WHcAg和HBcAg高度保守.结论 建立了高效表达WHcAg的方法,制备了针对WHcAg单克隆抗体.并对WHcAg的线性B细胞表位进行了鉴定,发现WHcAg和HBcAg的N末端存在共同的线性B细胞表位.