人线粒体DNA缺失肝癌细胞株建立

• 作者: 凌贤龙 张国桥 陈正堂
• 来源期刊: 细胞生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 溴化乙锭 Southern杂交 PCR 线粒体DNA 肝癌
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 127-130
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2192字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7666.2007.01.025

摘要

人线粒体DNA缺失肝癌细胞株(p0SK-Hep1)的建立及鉴定.采用溴化乙锭(EB)诱导,PCR、Southern杂交及选择性培养方法进行鉴定.p0SK-Hep1细胞在含EB、无尿嘧啶和丙酮酸的选择培养基中从第1天始细胞逐渐悬浮、肿胀,培养第5天以后大量悬浮死亡,且贴壁疏松,10～12天细胞完全悬浮死亡.在选择性培养基中可以正常生长增殖成单层,有少量悬浮.同期非选择培养的SK-Hep1细胞生长正常.PCR结果显示,细胞色素氧化酶Ⅰ、Ⅱ(COⅪ、COⅫ)及内参G3PDH在SK-Hep1细胞中均可扩增出相应的条带,p0SK-Hep1细胞只见内参条带的形成.Southern杂交结果显示,p0SK-Hep1细胞未见COⅪ、COⅫ杂交条带形成.经EB诱导后成功地获得了p0SK-Hep1细胞株.