siRNA电转化幽门螺杆菌抑制空泡毒素基因mRNA表达

• 作者: 严燕国 何裕隆 彭俊生 董文广 蔡世荣 詹文华 赵刚 马晋平
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 电转化 螺杆菌,幽门 RNA干扰 基因,VacA
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2244-2247
• 页数: 4页
• 分类号: R363
• 字数: 3383字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2007.11.036

摘要

目的:利用RNA干扰(RNAi)技术原理,优化小分子干扰RNA(siRNA)电转化幽门螺杆菌(Hp)的条件,并观察电转化后空泡毒素基因(VacA)的mRNA表达是否受到抑制.方法:合成5对特异siRNA为实验组:S1、S2、S3、S4、S5,1对非特异siRNA为对照组:S6.设定不同的电场强度及脉冲时间,探索电转化Hp的最佳条件,并观察转化效率和电转化后Hp存活率.在最佳电转化条件下将上述6对siRNA转化Hp,在不同时点通过RTPCR方法检测VacA mRNA的抑制率.结果:电场强度和脉冲时间是影响电转化效率的2个关键因素,在25 kV/cm电场强度下脉冲6ms时,电转化效率最高达91%,S2、S4组在转化后VacA mRNA抑制率分别为65%和77%.结论:适当的场强和脉冲时间的组合可使转化效率达到最大值.靶向siRNA可以抑制Hp VacA的mRNA表达.