新城疫病毒强弱毒株PCR-RFLP鉴别方法的建立

• 作者: 刘以恒 刘桂生 刘玉良 卜绍全 施运潭 颜健华 黄玉梅
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒 PCR-RFLP 鉴别诊断
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 3015字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2007.04.001

摘要

设计1对特异性引物扩增新城疫病毒F蛋白基因460 bp大小片段,而后利用PstⅠ和Bbe Ⅰ进行酶切,弱毒株酶切出120 bp和220 bp两个片段,而强毒株酶切出120 bp和340 bp两个片段,经敏感性、特异性试验,表明该方法敏感性高、特异强.用该PCR-RFLP检测了170份病料,检出强毒株5份、弱毒株1份,PCR阳性病料经SPF鸡胚进行病毒分离,用MDT、ICPI试验测定其生物学毒力,并对它们的F蛋白基因克隆测序,通过MDT、ICPI和推导氨基酸裂解位点分析,确定其毒力的结果与PCR-RFLP检测结果一致.表明该方法快速、特异、敏感,很适合于鸡群中新城疫快速诊断和新城疫病原学监测.