短发夹RNA抑制肝癌细胞HepG2 COX-2基因表达的探讨

• 作者: 刘靳波 刘预 杨义明 涂植光 陈亚芹
• 来源期刊: 中国肿瘤临床
• 学科: 医学
• 关键词: 短发夹RNA 环氧化酶-2 重组表达质粒 细胞周期
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 566-569
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2754字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8179.2007.10.008

摘要

目的:研究shRNA对肝癌细胞株HepG2中COX-2基因表达的抑制作用,同时检测对细胞周期和细胞生长的影响.方法:设计、合成一对环氧化酶-2(COX-2)基因编码的反向重复序列,中间间隔9个核苷酸序列,定向克隆至质粒载体pGenesil-1,构建抑制COX-2基因的短发夹RNA(short hairpin RNA shRNA)的重组表达质粒pshRNA-COX-2,用脂质体LipofectamineTM2000转染肝癌细胞HepG2,经RT-PCR和Western blot分别检测pshRNA-COX-2重组表达质粒对COX-2 mRNA和蛋白抑制效应,流式细胞仪检测细胞周期、细胞计数检测细胞生长变化.结果:pshRNA-COX-2重组表达质粒能够抑制COX-2基因表达.与未转染肝癌细胞HepG2相比,pshRNA-COX-2重组表达质粒转染肝癌细胞后,COX-2 mRNA和蛋白表达明显降低,抑制率分别为69.9%和50.3%;G0-G1期细胞由55.4%上升为77.9%,S期细胞由31.1%下降为16.2%;细胞生长明显减慢.结论:构建的pshRNA-COX-2重组表达载体能够显著抑制COX-2基因表达;引起G0-G1期细胞增多,S期细胞减少,从而阻止肝癌细胞生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘预	重庆市肿瘤研究所临床检验中心	36	317	10.0	17.0