人白细胞介素29在cos-7细胞中表达及其体外抗乙型肝炎病毒作用

• 作者: 张胜权 徐从贞 罗欣 陈兵 鲁云霞
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 白细胞介素29(IL-29) 克隆 表达 抗乙肝病毒活性
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 411-414
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3459字
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆人细胞因子IL-29全长cDNA及其在cos-7细胞中表达,并初步探讨表达产物体外抗乙肝病毒(HBV)作用.方法:分离外周血单个核细胞;VSV感染后,提取总RNA,通过一步法RT-PCR获得IL-29全长cDNA.DNA测序正确后,将IL-29 cDNA的编码框序列构建到真核表达载体psectagB/His-myc中.氨苄青霉素板筛选及PCR鉴定,挑出阳性克隆进行扩增、转染cos-7细胞并经潮霉素及有限稀释法筛选稳定表达克隆.SDS-PAGE、Western blot鉴定,Ni2+亲和层析分离纯化得到主带分子量为33 000组氨酸标签重组人IL-29融合蛋白.体外以HepG2.2.2.15为靶细胞观察rhIL-29对HepG2.2.2.15培养上清液中HBV表面抗原(HBsAg)及e抗原(HBeAg)影响.结果:成功获得人IL-29全长cDNA并在cos-7细胞中稳定表达.SDS-PAGE、Western blot分析显示表达的rhIL-29融合蛋白为几个蛋白质区带,分子量在20 000～33 000之间纯化的rhIL-29融合蛋白,主带在33 000附近.rhIL-29融合蛋白具有抑制HBsAg及HBeAg分泌作用并且具有剂量效应,抑制率分别达85%.结论:获得具有生物活性的rhIL-29融合蛋白.rhIL-29融合蛋白在体外具有抑制HepG2.2.2.15细胞分泌HBsAg及HBeAg作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗欣	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	41	130	6.0	8.0
2	张胜权	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	64	295	8.0	14.0
3	陈兵	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	28	94	5.0	7.0
4	鲁云霞	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	48	229	8.0	12.0
5	徐从贞	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	15	74	4.0	7.0