小鼠白细胞介素12基因的钓取及其在COS-7细胞中的表达

• 作者: 刘晓冬 刘树铮 杨英
• 来源期刊: 白求恩医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素12 RT-PCR COS-7细胞转染 pNG-mIL-12
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 12-13
• 页数: 2页
• 分类号: R392.13|Q786
• 字数: 1868字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2001.01.004

摘要

目的：钓取小鼠白细胞介素12（mIL-12）p40和p35 cDNA并检测其在哺乳动物细胞（COS-7）中的表达。方法：RT-PCR法从小鼠腹腔巨噬细胞mRNA中扩增p40和p35亚基；脂质体LipofectAMINE将质粒pNG-mIL-12转染至COS-7 细胞， ELISA法检测不同时间mIL-12表达水平。结果：①RT-PCR法扩增出特异的p40和p35亚基，p35亚基克隆至pKS载体测序；②ELISA法检测转染pNG-mIL-12的COS-7细胞上清有mIL-12分泌。结论：为进一步研究mIL-12的免疫调节机制及其抑瘤作用奠定了基础。