人胰岛淀粉样多肽沉淀细胞模型的体外构建

• 作者: 张宏利 徐佳 李果 田景琰 骆天红
• 来源期刊: 上海交通大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 胰岛淀粉样多肽 基因克隆 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 271-274
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R587
• 字数: 3476字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2007.03.009

摘要

目的 构建人胰岛淀粉样多肽(hIAPP)基因真核表达载体,并在无内源性IAPP表达的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株上进行体外表达实验,建立可产生hIAPP沉淀的细胞模型. 方法 应用RT-PCR技术扩增得到hIAPP cDNA,将其克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IAPP; 随后用lipofectamine 2000介导转染CHO细胞,以RT-PCR法检测重组质粒在mRNA水平的表达,以Thiaflavin S染色的方法检测重组质粒在蛋白水平的表达. 结果 构建的pcDNA 3.1-hIAPP真核表达体系成功转染体外培养的CHO细胞,目的基因在mRNA 水平和蛋白水平均有表达,转染后培养48 h内的CHO细胞用Thioflavin S染色,与阴性对照相比较,证实有hIAPP的表达而导致细胞内淀粉样沉积发生. 结论 构建了hIAPP真核表达质粒, 并成功在体外表达, 从而建立了可产生IAPP淀粉样沉淀的体外哺乳动物细胞模型,为进一步研究胰岛淀粉样沉积的发病机制提供了良好的平台.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐佳		1	0	0.0	0.0
2	张宏利		5	18	3.0	4.0
3	骆天红		8	15	3.0	3.0
4	田景琰		1	0	0.0	0.0
5	李果		13	72	4.0	8.0