小鼠未成熟关节透明软骨细胞的培养与生物学特征研究

• 作者: 任步方 周琦 朱雅萍 王君 邓廉夫 魏立
• 来源期刊: 中华关节外科杂志（电子版）
• 学科: 医学
• 关键词: 软骨细胞 细胞低氧 鼠
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 45-51
• 页数: 7页
• 分类号: R6
• 字数: 5900字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-134X.2007.01.017

摘要

目的 建立小鼠未成熟关节透明软骨细胞分离、培养的方法,探讨低氧环境对软骨细胞活性及糖代谢的影响. 方法 机械分离与酶消化相结合,分离、纯化小鼠未成熟关节软骨细胞.分别于低氧( O2体积百分比为 2%)和常氧( O2体积百分比 21%)条件下培养,应用四甲基偶氮唑盐( MTT)法检测细胞活性; RT PCR检测细胞葡萄糖转运体 -1,3及磷酸果糖激酶 mRNA的表达;葡萄糖氧化酶方法测定细胞对葡萄糖的摄取量. 结果Ⅱ型胶原免疫组化和阿利辛蓝染色证实获得细胞为透明软骨细胞.低氧培养环境可提升细胞的增殖能力,诱导细胞表达低氧诱导因子 -1α;伴随低氧诱导因子 -1α的表达及其表达量的提高,葡萄糖转运体 -1,3和磷酸果糖激酶的表达水平升高,细胞对葡萄糖的摄取量增加. 结论 所建立的分离、培养方法可以获得高纯度的透明软骨细胞;软骨细胞可通过氧感应机制以适应低氧环境而调整其代谢和生存状态.