貉血清IgG纯化及抗血清的制备

• 作者: 全雄志 刘先菊 刘牧 张连峰 杨帆 林树柱 秦川
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 亲和层析 沉淀 貉 IgG
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 662-665
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 3160字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2007.11.012

摘要

目的 制备高纯度貉血清IgG 和兔抗貉IgG抗血清,作为建立多种动物抗体检测技术的储备.方法 采用Hitrap Protein A亲和层析及盐析再沉淀法纯化貉血清IgG,通过PAGE电泳和Western-Blot免疫印迹法对IgG作纯度及免疫活性检测;常规免疫法制备兔抗貉IgG血清.结果 貉血清IgG与Protein G虽有较强的结合力,但同时也结合血清中其他杂蛋白;用二步纯化法可从5 mL貉血清中纯化IgG约7 mg,电泳和免疫印迹测定显示,IgG纯度大于95%,常规免疫法制备抗血清免疫双扩散效价达1∶32.结论 建立了可行的貉血清IgG的纯化方法和高效价的兔抗貉血清IgG抗血清,为貉血清 IgG二级抗体酶联物的制备储备了资源.