PTD4-GFP-VP3融合蛋白在人肝癌细胞HepG2中的定位观察及凋亡诱导效应的实验研究

• 作者: 孙军 宗义强 屈伸 彭冬君 毕昊 王小婷 王小波 邹珺 闫莹
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: VP3蛋白 PTD4多肽 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 204-208
• 页数: 5页
• 分类号: Q71
• 字数: 3977字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2007.03.004

摘要

目的 观测PTD4-GFP-VP3融合蛋白诱导人肝癌细胞HepG2的凋亡效应及其在肿瘤细胞中的定位与其凋亡效应关系的研究.方法 构建PTD4-GFP-VP3融合蛋白的原核表达载体,利用人源肝癌细胞株HepG2,经细胞透膜实验在激光共聚焦显微镜下观察PTD4介导的融合蛋白透膜效应,DAPI染色观测该蛋白在细胞中的定位;利用TUNEL法观察PTIM-GFP-VP3融合蛋白诱导肿瘤细胞的凋亡效应,并利用流式细胞仪检测其凋亡率.结果 PTD4-GFP-VP3融合蛋白在孵育细胞0.5 h后即可透过细胞膜进入到细胞质中,12 h后定位于细胞核并诱导肿瘤细胞凋亡,48 h达到最高凋亡效应.结论 PTD4能携带GFP-VP3融合蛋白穿透细胞膜,在肿瘤细胞中具有核定位效应,并能诱导肿瘤细胞凋亡,为后期进一步研究VP3的凋亡机制及其抗肿瘤治疗奠定了基础.