TAT透膜肽介导VP3蛋白诱导HepG2细胞凋亡效应的研究

• 作者: 孙军 宗义强 屈伸 彭冬君 王小波 邹珺 闫莹 陈娟
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: TAT透膜肽 VP3融合蛋白 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 181-185
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3682字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2006.03.004

摘要

目的探讨TAT透膜肽介导VP3融合蛋白穿透生物膜及诱导HepG2细胞凋亡的效应,为临床应用生物大分子药物治疗肿瘤提供实验基础.方法常规构建TAT-VP3、TAT-GFP及TAT-GFP-VP3的3种融合蛋白的pET28a原核表达载体,IPTG诱导融合蛋白表达,经镍金属鳌合层析柱纯化获得融合蛋白.通过蛋白转导实验观察其穿透生物膜的效应,利用DAPI染色及TUNEL法观察其诱导HepG2细胞凋亡的效应.结果融合蛋白TAT-GFP及TAT-GFP-VP3可进入体外培养的HepG2细胞,在荧光下可见绿色荧光,融合蛋白TAT-VP3及TAT-GFP-VP3可诱导体外培养的细胞凋亡.结论在VP3的N端加上TAT透膜肽形成的融合蛋白可有效穿透细胞膜,TAT-VP3融合蛋白能诱导HepG2细胞凋亡.