RNA干扰抑制Hep-2细胞人端粒酶逆转录酶基因表达对放射敏感性的影响

• 作者: 刘诗权 周云峰 周福祥 於海军 谢丛华 邱慧兵 骆志国
• 来源期刊: 中华肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNAi 人端粒酶逆转录酶 Hep-2 端粒酶 放射敏感性
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 9-13
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 5506字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0253-3766.2007.01.003

摘要

目的 构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因特异性短发夹样RNA(shRNA)真核表达载体,观察其联合射线对人喉癌Hep-2细胞端粒酶活性和细胞存活的影响,研究hTERT基因在放射增敏中的作用.方法 根据hTERT mRNA编码序列设计RNA干扰(RNAi)靶点,构建重组表达质粒pshRNA-hTERT,构建成功后,转染Hep-2细胞并作射线处理,用端粒重复序列扩增方法(TRAP-PCR-ELISA)检测端粒酶活性的动态变化,采用克隆形成分析方法观察质粒pshRNA-hTERT对Hep-2细胞放射敏感性的影响,计算放射增敏比SERSF2.结果 转染质粒pshRNA-hTERT后,Hep-2细胞的hTERT mRNA表达抑制率为60.8%,质粒pshRNA-hTERT不仅能够抑制Hep-2细胞的端粒酶活性(P＜0.05),而且还可以抑制辐射诱导的端粒酶活性上升(P＜0.05).照射前经pshRNA-hTERT处理24 h,明显降低了2 Gy照射后Hep-2细胞的存活分数(85.7%),与单纯放射组(67.7%)相比,差异有统计学意义(P＜0.05),pshRNA-hTERT的放射增敏比SERSF2为1.27.结论 RNAi显著抑制了靶基因hTERT的表达,质粒pshRNA-hTERT能明显抑制2Gy照射诱导的Hep-2细胞端粒酶活性升高,并显著提高其体外放射敏感性;质粒pshRNA-hTERT的放射增敏作用可能与端粒酶活性受抑制有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周云峰	武汉大学肿瘤防治研究中心	147	888	14.0	23.0
2	周福祥	武汉大学中南医院肿瘤放化疗科	75	411	10.0	17.0
3	谢丛华	武汉大学中南医院肿瘤放化疗科	123	675	11.0	21.0
4	刘诗权	武汉大学肿瘤防治研究中心	43	302	10.0	16.0
5	於海军	武汉大学中南医院肿瘤放化疗科	11	61	5.0	7.0
6	骆志国	武汉大学中南医院肿瘤放化疗科	6	31	4.0	5.0
7	邱慧兵	襄樊市中心医院肿瘤科	1	13	1.0	1.0