猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因的克隆和序列分析及其基因表达

• 作者: 吴志敏 曹少先 杨利国 舒邓群 茆达干 陈荣达
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 基因克隆 序列分析 基因表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 234-240
• 页数: 7页
• 分类号: S828|Q344+.13
• 字数: 4533字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2286.2007.02.015

摘要

采取三元杂交猪的外周血,提取单核细胞总RNA,采用RT-PCR克隆猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)cDNA(GenBank登录号为DQ108393).以pcDNA3.1 (-)为质粒载体,构建猪GM-CSF基因真核表达质粒pGM-CSF,对克隆片段进行测序,并进行不同物种间同源性的比较.将重组质粒转染COS-7细胞,Western blotting鉴定表达蛋白的特异性.序列分析表明,GM-CSF的cDNA开放阅读框为435 bp,编码144个氨基酸和大部分信号肽,与用作PCR引物设计的参考序列比较,其核苷酸的同源性为97.5%,氨基酸的同源性为95.1%,同绵羊、人、牛、小鼠和犬的GM-CSF序列比较,其核苷酸的同源性分别为86.2%、80.5%、81.7%、69.7%和81.8%,氨基酸的同源性分别为78.5%、71.3%、70.3%、55.9%和71.5%.Western blotting证实目的基因可以在真核细胞中特异性的表达GM-CSF蛋白.以上结果表明,猪的GM-CSF基因被成功克隆,它存在着种属特异性.这为进一步研究该基因的生物学作用特别是利用GM-CSF增强DNA疫苗的免疫效果奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨利国	南京农业大学动物繁育研究所	212	1759	21.0	29.0
3	舒邓群	南京农业大学动物繁育研究所	69	384	11.0	15.0
7	茆达干	南京农业大学动物繁育研究所	85	1008	18.0	26.0
8	曹少先	南京农业大学动物繁育研究所	25	412	14.0	20.0
11	吴志敏	江西农业大学动物科技学院	9	99	7.0	9.0
12	陈荣达	江西农业大学动物科技学院	4	46	4.0	4.0