荧光定量RT-PCR检测神经母细胞瘤细胞MYCN基因mRNA的表达

• 作者: 冯晨 刘立真 唐锁勤 王建文 高晓宁 龙卉
• 来源期刊: 中国当代儿科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经母细胞瘤 MYCN 荧光定量RT-PCR 绿色荧光染料Ⅰ
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 47-50
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2947字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-8830.2007.01.012

摘要

目的 MYCN基因表达对神经母细胞瘤的治疗及预后评估有指导意义,目前国内对于MYCN基因mRNA的定量检测未见报道,该研究拟采用SYBR绿色荧光染料Ⅰ(SYBR GREEN Ⅰ)实时检测的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测神经母细胞瘤细胞系LA-N-5细胞MYCN基因mRNA的表达,并对其可行性及实用性进行研究,力争探索出微量瘤标本的MYCN基因mRNA定量检测的可行方法.方法 提取神经母细胞瘤细胞系LA-N-5细胞总RNA,采用SYBR GREEN Ⅰ实时检测的RT-PCR检测其MYCN基因mRNA的表达,并用3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)作为内参照,将MYCN基因的mRNA拷贝数与GAPDH的拷贝数相除,结果为单细胞MYCN基因mRNA的表达水平.结果 反应标准曲线有良好的相关性(R2＞0.99),PCR产物特异,神经母细胞瘤细胞系LA-N-5 MYCN基因mRNA的表达水平为17.4±1.2.结论 只要严格控制PCR反应条件,SYBR GREEN Ⅰ定量RT-PCR法可以作为一种良好的定量PCR方法对神经母细胞瘤细胞系LA-N-5 MYCN基因mRNA的表达进行检测,此方法为临床微量神经母细胞瘤瘤组织的MYCN基因mRNA的定量检测提供了可能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王建文	中国人民解放军总医院小儿内科	35	248	10.0	15.0
2	高晓宁	中国人民解放军总医院小儿内科	17	94	6.0	8.0
3	唐锁勤	中国人民解放军总医院小儿内科	46	261	10.0	14.0
4	冯晨	中国人民解放军总医院小儿内科	13	82	4.0	9.0
5	龙卉	中国人民解放军总医院小儿内科	5	32	3.0	5.0
6	刘立真	中国人民解放军总医院小儿内科	12	71	4.0	8.0